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pcr技术模板是什么（pcr技术模板是什么样的）

网站模板2年前 (2023-02-09)500

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本文目录一览：

1、什么是PCR?主要的技术步骤是什么?
2、什么叫PCR技术？
3、什么叫做“PCR”？
4、PCR的技术原理是什么？
5、PCR扩增的模板

什么是PCR?主要的技术步骤是什么?

PCR即聚合酶链式反应（Polymerase chain reaction）的缩写，它是体外酶促合成特异DNA片段的方法。这一方法的要点是合成两个分别互补于待扩增DNA片段两端的小片段引物，在含有引物、待扩增DNA模板核苷酸底物和DNA多聚酶的反应体系中DNA复制反复进行，在短时间内可以取得大量扩增产物。其原理是寡聚核苷酸链引物在DNA聚合酶的作用下沿模板延伸，合成两个与靶DNA两侧序列互补的引物，在体外进行靶DNA的重复合成。

主要的技术步骤是：

（1）DNA变性加热使靶DNA序列双链解离成单链DNA。

（2）引物与靶DNA退火适当降低温度，使两个引物分别结合成靶DNA两条的3′末端向5′末端延伸。

（3）引物延伸在DNA聚合酶的催化下，引物沿着靶DNA3′末端向5′末端延伸。新合成的DNA链在变性解离后，又可作为模板与引物杂交，并且在DNA聚合酶的催化下，引导合成新的靶DNA链。如此反复进行以上3个步骤，即可使靶DNA片段指数性扩增。

什么叫PCR技术？

PCR技术也就是基因扩增技术，它是通过基因扩增仪，在细胞外进行DNA复制，由1个DNA分子增加到2个，然后依次增加到4个，8个…，使分子数目呈几何级数增加，以在短时间内获得足够的DNA，供研究用的一种技术。

PCR技术的出现，使生物学的研究一大突破。在PCR技术问世之前，人们无法查出爱滋病病毒感染者，因为这种病毒在感染者体内的含量很少，且难于培养。在PCR技术问世之后，可将爱滋病病毒的核酸进行扩增从而查出受感染者，并可研究治疗方法。

PCR技术，还可对运动场上男扮女装的“女运动员”加以识别。过程如下：从自报是女运动员头上取1根带毛囊的头发，加蒸馏水煮沸，，使毛囊细胞破裂；把高速离心分离出的染色体放入其因扩增仪中进行基因扩增；大约2小时后，用一定的染料对扩增液染色；最后，把经染色的扩增液体涂在琼脂板上，用紫外线照射，如果出现橘红色光带，则说明染色体中含有睾丸决定基因（在Y染色体上），为男性，否则为女性。

目前，这项技术是性别鉴定中的最佳技术，准确性可达100%，也是迄今为止最文明的性别检测法之一，只要1根毛发即可辨男女。

1992年，在巴塞罗那奥运会上，组委会决定首先使用基因扩增法识别性别，但由于准备不足，只局限用于最可疑的少数运动员。1993年，在我国上海举行的首届东亚运动会上，全面使用了这一技术。在这届运动会前夕，有关科研人员进行了1037例“预试”，还进行了10例“双盲”（验方和递方都不知道头发是取自男还是女）试验，结果表明，准确率达100%！这种既文明又准确的性别鉴定法，解除了“性别舞弊”对运动会官员的困扰。

PCR技术已经在分子生物学中发挥了重要作用。可以预知，它在遗传病诊断、治疗，在动、植物育种，以及在司法破案等方面，将会发挥更大的作用。

什么叫做“PCR”？

PCR（Polymerase Chain Reaction ）即聚合酶链式反应

PCR技术的基本原理：该技术是在模板DNA、引物和四种脱氧核糖核苷酸存在下，依赖于DNA聚合酶的酶促合成反应。DNA聚合酶以单链DNA为模板，借助一小段双链DNA来启动合成，通过一个或两个人工合成的寡核苷酸引物与单链DNA模板中的一段互补序列结合，形成部分双链。在适宜的温度和环境下，DNA聚合酶将脱氧单核苷酸加到引物3´-OH末端，并以此为起始点，沿模板5´→3´方向延伸，合成一条新的DNA互补链。

PCR反应的基本成分包括：模板DNA(待扩增DNA)、引物、4种脱氧核苷酸(dNTPs)、DNA聚合酶和适宜的缓冲液。类似于DNA的天然复制过程，其特异性依赖于与靶序列两端互补的寡核苷酸引物。PCR由变性--退火--延伸三个基本反应步骤构成：①模板DNA的高温变性：模板DNA经加热至93℃左右一定时间后，使模板DNA双链或经PCR扩增形成的双链DNA解离，使之成为单链，以便它与引物结合，为下轮反应作准备；②模板DNA与引物的低温退火(复性)：模板DNA经加热变性成单链后，温度降至55℃左右，引物与模板DNA单链的互补序列配对结合；③引物的适温延伸：DNA模板--引物结合物在TaqDNA聚合酶的作用下，以dNTP为反应原料，靶序列为模板，按碱基配对与半保留复制原理，合成一条新的与模板DNA 链互补的半保留复制链重复循环变性-退火-延伸三过程，就可获得更多的“半保留复制链”，而且这种新链又可成为下次循环的模板。每完成一个循环需2～4分钟， 2～3小时就能将待扩目的基因扩增放大几百万倍。

PCR的技术原理是什么？

PCR的技术原理是借着聚合酶在一对方向相反的引子协助之下，将两个引子之间特定的DNA反复复制。由于新制成的DNA可以被再拿来做为制造DNA的模板，所以此种复制是以几何级数的倍数增加，可以在短短数小时之内，将目标的DNA放大至百万倍之多。同时使用的一对引子的限制之下，所合成的DNA片段，99.9%以上是介于两个引子之间的特定DNA长度。因此PCR是一种非常灵敏，而且具有很高特异性的一种技术。